Oli pur de Saposhnikovia divaricata per a la fabricació d'espelmes i sabó oli essencial difusor a l'engròs nou per a difusors de cremadors de canya

breu descripció:

2.1. Preparació de SDE

Els rizomes de SD es van comprar com una herba seca a Hanherb Co. (Guri, Corea). Els materials vegetals van ser confirmats taxonòmicament pel Dr. Go-Ya Choi de l'Institut de Medicina Oriental de Corea (KIOM). Es va dipositar un exemplar de val (número 2014 SDE-6) a l'herbari coreà de recursos herbaris estàndard. Els rizomes secs de SD (320 g) es van extreure dues vegades amb etanol al 70% (amb un reflux de 2 h) i l'extracte es va concentrar a pressió reduïda. La decocció es va filtrar, liofilitzar i emmagatzemar a 4 °C. El rendiment d'extracte sec de materials de partida bruts va ser del 48,13% (p/p).

2.2. Anàlisi quantitativa de cromatografia líquida d'alt rendiment (HPLC).

L'anàlisi cromatogràfica es va realitzar amb un sistema HPLC (Waters Co., Milford, MA, EUA) i un detector de fotodíodes. Per a l'anàlisi HPLC de SDE, el primerO-L'estàndard de glucosilcimifugina es va comprar a l'Institut de Promoció de Corea per a la Indústria de la Medicina Tradicional (Gyeongsan, Corea) isec-O-glucosilhamaudol i 4′-O-β-D-glucosil-5-O-El metilvisaminol es va aïllar al nostre laboratori i es va identificar mitjançant anàlisis espectrals, principalment per RMN i MS.

Les mostres de SDE (0,1 mg) es van dissoldre en etanol al 70% (10 ml). La separació cromatogràfica es va realitzar amb una columna XSelect HSS T3 C18 (4,6 × 250 mm, 5μm, Waters Co., Milford, MA, EUA). La fase mòbil constava d'acetonitril (A) i àcid acètic al 0,1% en aigua (B) a un cabal d'1,0 ml/min. Es va utilitzar un programa de gradient de diversos passos de la següent manera: 5% A (0 min), 5-20% A (0-10 min), 20% A (10-23 min) i 20-65% A (23-40 min). ). La longitud d'ona de detecció es va escanejar a 210-400 nm i es va registrar a 254 nm. El volum d'injecció era de 10,0μL. Es van preparar solucions estàndard per a la determinació de tres cromones a una concentració final de 7,781 mg/mL (prim-O-glucosilcimifugina), 31,125 mg/mL (4′-O-β-D-glucosil-5-O-metilvisaminol), i 31,125 mg/ml (sec-O-glucosilhamaudol) en metanol i conservat a 4°C.

2.3. Avaluació de l'activitat antiinflamatòriaIn vitro

2.3.1. Cultiu cel·lular i tractament de mostres

Les cèl·lules RAW 264,7 es van obtenir de la American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA, EUA) i es van cultivar en medi DMEM que contenia un 1% d'antibiòtics i un 5,5% de FBS. Les cèl·lules es van incubar en una atmosfera humidificada d'un 5% de CO2 a 37 °C. Per estimular les cèl·lules, el medi es va substituir per medi DMEM fresc i lipopolisacàrid (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, EUA) a l'1.μEs va afegir g/mL en presència o absència de SDE (200 o 400μg/mL) durant 24 hores addicionals.

2.3.2. Determinació d'òxid nítric (NO), prostaglandina E2 (PGE2), factor de necrosi tumoral-α(TNF-α), i la producció d'interleucina-6 (IL-6).

Les cèl·lules es van tractar amb SDE i es van estimular amb LPS durant 24 h. La producció de NO es va analitzar mesurant nitrits utilitzant el reactiu de Griess segons un estudi anterior.12]. Secreció de les citocines inflamatòries PGE2, TNF-α, i IL-6 es va determinar mitjançant un kit ELISA (sistemes d'R+D) segons les instruccions del fabricant. Els efectes de la SDE sobre la producció de NO i citocines es van determinar a 540 nm o 450 nm mitjançant un Wallac EnVision™Lector de microplaques (PerkinElmer).

2.4. Avaluació de l'activitat d'antiosteoartritisIn Vivo

2.4.1. Animals

Es van comprar rates Sprague-Dawley mascles (7 setmanes) a Samtako Inc. (Osan, Corea) i es van allotjar en condicions controlades amb un cicle de llum/foscor de 12 hores a°C i% d'humitat. Les rates van rebre una dieta de laboratori i aiguaad libitum. Tots els procediments experimentals es van realitzar d'acord amb les directrius dels Instituts Nacionals de Salut (NIH) i es van aprovar pel Comitè d'ús i cura dels animals de la universitat de Daejeon (Daejeon, República de Corea).

2.4.2. Inducció de l'OA amb MIA en rates

Els animals van ser aleatoritzats i assignats a grups de tractament abans de l'inici de l'estudi (per grup). Solució MIA (3 mg/50μL de solució salina al 0, 9%) es va injectar directament a l'espai intraarticular del genoll dret sota anestèsia induïda amb una barreja de ketamina i xilazina. Les rates es van dividir aleatòriament en quatre grups: (1) el grup de solució salina sense injecció de MIA, (2) el grup de MIA amb injecció de MIA, (3) el grup tractat amb SDE (200 mg/kg) amb injecció de MIA i (4) ) el grup tractat amb indometacina (IM-) (2 mg/kg) amb injecció de MIA. Les rates es van administrar per via oral amb SDE i IM 1 setmana abans de la injecció de MIA durant 4 setmanes. La dosi de SDE i IM utilitzada en aquest estudi es va basar en les emprades en estudis anteriors [10,13,14].

2.4.3. Mesures de la distribució de pes de la pata posterior

Després de la inducció de l'OA, l'equilibri original de la capacitat de suport de pes de les potes posteriors es va interrompre. Es va utilitzar un provador d'incapacitat (instrumentació Linton, Norfolk, Regne Unit) per avaluar els canvis en la tolerància de suport de pes. Les rates es van col·locar amb cura a la cambra de mesura. La força de suport de pes exercida per l'extremitat posterior es va promediar durant un període de 3 s. La relació de distribució del pes es va calcular mitjançant l'equació següent: [pes a la extremitat posterior dreta/(pes a la extremitat posterior dreta + pes a la extremitat posterior esquerra)] × 100 [15].

2.4.4. Mesures dels nivells de citocines sèriques

Les mostres de sang es van centrifugar a 1.500 g durant 10 min a 4 °C; després es va recollir el sèrum i es va emmagatzemar a -70 ° C fins al seu ús. Els nivells d'IL-1β, IL-6, TNF-α, i PGE2 al sèrum es van mesurar mitjançant kits ELISA de R&D Systems (Minneapolis, MN, EUA) segons les instruccions del fabricant.

2.4.5. Anàlisi quantitativa de RT-PCR en temps real

L'ARN total es va extreure del teixit de l'articulació del genoll mitjançant el reactiu TRI® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, EUA), es va transcriure inversament a ADNc i es va amplificar per PCR mitjançant un kit de PCR TM One Step RT amb verd SYBR (Applied Biosystems). , Grand Island, NY, EUA). La PCR quantitativa en temps real es va realitzar mitjançant el sistema de PCR en temps real Applied Biosystems 7500 (Applied Biosystems, Grand Island, NY, EUA). Les seqüències de cebador i la seqüència de sonda es mostren a la taula1. Es van amplificar alíquotes d'ADNc de mostra i una quantitat igual d'ADNc de GAPDH amb la barreja mestra TaqMan® Universal PCR que contenia ADN polimerasa segons les instruccions del fabricant (Applied Biosystems, Foster, CA, EUA). Les condicions de PCR van ser de 2 min a 50 ° C, 10 min a 94 ° C, 15 s a 95 ° C i 1 min a 60 ° C durant 40 cicles. La concentració del gen objectiu es va determinar mitjançant el mètode comparatiu Ct (número de cicle del llindar al punt d'encreuament entre la trama d'amplificació i el llindar), segons les instruccions del fabricant.

Preu FOB:US $ 0,5 - 9.999 / Peça

Quantitat mínima de comanda:100 Peça/Peces

Capacitat de subministrament:10000 peces/peces al mes

Envieu-nos un correu electrònic

Detall del producte

Etiquetes de producte

L'artrosi (OA) és el trastorn musculoesquelètic més freqüent i la malaltia degenerativa articular més freqüent en la gent gran.1]. L'OA és una condició causada en part per una lesió, la pèrdua de l'estructura i la funció del cartílag i la desregulació de les vies proinflamatòries i antiinflamatòries.2,3]. Afecta principalment el cartílag articular i l'os subcondral de les articulacions sinovials i provoca un fracàs articular, provocant dolor en suportar pes, inclòs caminar i estar dempeus.4].

No hi ha cura per a l'OA, ja que és molt difícil restaurar el cartílag un cop destruït.5]. Els objectius del tractament són alleujar el dolor, mantenir o millorar la mobilitat articular, augmentar la força de les articulacions i minimitzar els efectes incapacitants de la malaltia. Els tractaments farmacològics de l'OA tenen com a objectiu reduir el dolor per tal d'augmentar la funció articular i la qualitat de vida del pacient. Tot i que la destrucció del cartílag és el principal esdeveniment de l'OA, la degradació del col·lagen és l'incident fonamental que determina la progressió irreversible de l'OA en associació amb la inflamació.6,7]. S'espera que els tractaments amb activitat antiinflamatòria i condroprotectora alleugen el dolor i mantinguin la integritat de la matriu en pacients amb OA.

Per tant, la disminució de la inflamació probablement serà beneficiosa en la gestió de l'OA. Estudis recents suggereixen papers protectors dels recursos herbaris en la progressió de l'OA, en termes de mitigació de la inflamació dels condròcits i la destrucció addicional del cartílag, a través de la seva capacitat d'interaccionar amb teixits associats a les articulacions, donant lloc a la mitigació del dolor articular.8].

L'arrel deSaposhnikovia divaricataSchischkin (Umbelliferae) s'ha utilitzat àmpliament en la medicina tradicional per al tractament del mal de cap, el dolor, la inflamació i l'artritis a Corea i la Xina.9,10]. Els diversos efectes farmacològics deSaposhnikovia divaricata(SD) també inclouen propietats antiinflamatòries, analgèsiques, antipirètiques i antiartrítiques.9,11]. Un estudi recent va demostrar que l'extracte de cromona SD posseeix efectes potencials sobre l'artritis antireumatoide en un model de ratolí d'artritis induïda per col·lagen.10]; tanmateix, s'han realitzat pocs estudis per donar suport a l'activitat antiinflamatòria i antiartritis deSaposhnikovia divaricataextracte (SDE).

Per tant, el present estudi va investigar les activitats antiinflamatòries i antiosteoartritis d'un extracte d'etanol al 70% de SD. En primer lloc, es va avaluar l'efecte antiinflamatori de la SDEin vitroen cèl·lules RAW 264,7 induïdes per LPS. A continuació, es va mesurar l'efecte antiosteoartritis de la SDE avaluant la distribució de pes, la degradació del cartílag articular i les respostes inflamatòries en un model de rata d'OA induïda per iodoacetat monosòdic (MIA).